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            PBS緩沖液配制方法

            發布時間:2022-03-29 點擊量:139
               PBS是磷酸緩沖鹽溶液(phosphate buffer saline)一般作為溶劑,起溶解保護試劑的作用。它是生物化學研究中使用的一種緩沖液,主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,由于Na2HPO4和KH2PO4它們有二級解離,緩沖的pH值范圍很廣;而NaCl和KCl主要作用為增加鹽離子濃度。如有需要PBS還可以補加1 mmol/L CaCl2和0.5 mmol/L MgCl2,以提供雙價陽離子(注:PBS不是磷酸緩沖液:phosphate buffer solution,PB)。pbs緩沖液應高溫高壓滅菌后置于4攝氏度冰箱保存待用。
              PBS緩沖液由水、氯化鈉、弱酸KH2PO4和共軛堿Na2HPO4配制而成,通常將pH調至pH7.4。人體的pH值介于7.35至7.45之間,平均值為7.40。此外,PBS緩沖液還模擬了人體滲透壓和離子濃度。由于它對細胞無毒,因此被廣泛用于洗滌細胞、組織運輸和稀釋。尤其在動物細胞培養實驗中,常用于胰酶消化細胞前的細胞洗滌,徹底去除血清。
                PBS緩沖液的作用不僅僅如此,僅偽狂犬病毒要用它稀釋,一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。原因就是它具有鹽平衡、可調整的適宜pH緩沖作用,蒸餾水不具有鹽平衡作用,可以破壞生物蛋白的結構及生物特性;生理鹽水不具有調整pH的作用,對完整的、具有活性的物質不能保證其在最適條件下參與生物反應,所以使用PBS是首選。
              當然,磷酸緩沖液也不是萬能的,有的生物活性物質需要的條件比磷酸緩沖液還要高,就需要在平衡緩沖液中加入更多的成分,維持最佳的條件保證生物活性物質保持其最完整的特性。
              配制方法
              含0.05%吐溫-20的pH7.4的磷酸鹽緩沖液(簡稱為PBS-T)配制方法為:
              稱取磷酸二氫鉀(KH2PO4),磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O),(KCl),吐溫-20 ,加水。
              PBS:Phosphate Buffered Saline
              PBS 1L配方pH7.4:磷酸二氫鉀(KH2PO4):0.27g,
              磷酸氫二鈉(Na2HPO4):1.42g,
              (NaCl):8g,
              KCl)0.2g,
              加去離子水約800mL充分攪拌溶解,然后加入濃鹽酸調pH至7.4,zui后定容到1L
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