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            無血清凍存液的廠家為您講解細胞凍存步驟和復蘇步驟

            發布時間:2021-07-27 點擊量:472
               無血清細胞凍存液,通用于各種動物細胞株(腫瘤細胞和常規細胞),凍存細胞可在-80℃長期保存(>5 年)。該凍存液含 DMSO、葡萄糖等各種細胞營養成分,提高細胞存活率和活力,亦適合于無血清培養細胞和蛋白表達細胞。
              細胞凍存步驟:
              1、 常規方法收集對數期的貼壁細胞或懸浮細胞于試管中。
              2、 根據培養細胞的密度和凍存管的大小確定所需凍存細胞數。
              3、 將所需數目的細胞懸浮液置于離心管中,1000rmp,5 分鐘離心收集培養細胞沉淀,徹底棄去離心管中的上清液。
              4、 加入適量的Cell Freezing Medium 細胞凍存液于離心管中,使細胞濃度約為 5×105-1×107/ml。輕柔地混勻細胞,制成細胞混合液。
              5、 將離心管中的細胞混合液分裝于已標記的凍存管中,建議每管 1ml 或 1.5ml。
              6、 直接將分裝好的細胞凍存管放入-80℃超低溫冰箱中,可長期冷凍保存。
              7、 如果想液氮中長期保存,需先放入-80℃冰箱至少一天時間,方可移至液氮罐中保存。
              凍存細胞復蘇步驟:
              從冰箱中取出凍存的細胞,立即放入 37℃水浴槽中快速解凍。
              待凍存管中細胞混合液完全融化后,立即加入 1ml 細胞培養基于冷凍管中與細胞混合,加入適量的新鮮細胞培養基,使用移液管緩緩加入到細胞沉淀,輕柔地混勻,將細胞混合液移至事先準備好的培養容器中。
              鏡檢細胞后,可根據各自研究的需要和方法經行細胞常規培養。
                    以上僅供參考,希望對您有所幫助哦!
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